Balita

Kasalukuyang hindi pinagana ang Javascript sa iyong browser.Ang ilang mga tampok ng website na ito ay hindi gagana kung ang JavaScript ay hindi pinagana.
Magrehistro gamit ang iyong mga partikular na detalye at ang partikular na gamot ng interes, at tutugmain namin ang impormasyong ibibigay mo sa mga artikulo sa aming malawak na database at mag-email sa iyo kaagad ng isang PDF na kopya.
Ding Jingnuo, Zhao Weifeng, Department of Infectious Diseases, Suzhou University First Affiliated Hospital, Suzhou City, Jiangsu Province, 215000 Tel.mga tumor ng digestive system na may 5-taong kabuuang kaligtasan ng 14.1%.Maraming mga pasyente na may HCC ang nasuri sa isang advanced na yugto, kaya ang maagang pagsusuri ay mahalaga upang mabawasan ang dami ng namamatay mula sa HCC.Bilang karagdagan sa mga karaniwang ginagamit na indicator ng pagtuklas gaya ng serum alpha-fetoprotein (AFP), lens lectin-reactive alpha-fetoprotein (AFP-L3), at abnormal na prothrombin (vitamin K deficiency-induced protein II, PIVKA-II), fluid biopsy techniques Ito ay ipinakita na may halaga ng diagnostic sa pagtuklas ng HCC.Kung ikukumpara sa mga invasive procedure, ang fluid biopsy ay maaaring makakita ng mga nagpapalipat-lipat na malignant metabolites.Ang mga pamamaraan ng fluid biopsy ay nakakakita ng mga nagpapalipat-lipat na mga selula ng tumor, nagpapalipat-lipat na DNA ng tumor, nagpapalipat-lipat na RNA, at mga exosome at ginagamit para sa maagang pagsusuri, pagsusuri, at prognostic na pagsusuri ng HCC.Sinusuri ng artikulong ito ang molecular biology at paglalapat ng iba't ibang fluid biopsy techniques para ihiwalay ang mga promising biomarker na maaaring mga opsyon para sa maagang pagtatasa ng HCC para mapahusay ang maagang screening ng mga high-risk na HCC group.Mga keyword: fluid biopsy technique, hepatocellular carcinoma, high-risk group .
Ang Hepatocellular carcinoma (HCC) ay isang pangkaraniwang malignant na tumor ng digestive tract, na nasa ikaanim na ranggo sa mga bagong kaso ng malignant na tumor sa kapwa lalaki at babae.1 Sa buong mundo, ang kanser sa atay ay ang ikatlong nangungunang sanhi ng pagkamatay ng kanser pagkatapos ng kanser sa baga at colorectal, na bumubuo ng 8.3% ng mga pagkamatay na nauugnay sa kanser mula sa lahat ng malignant na neoplasma.1 Ang pagbabala ng HCC ay malapit na nauugnay sa yugto sa diagnosis.Ang mga pangunahing dahilan para sa mahinang kaligtasan ng buhay sa HCC ay intrahepatic metastases, portal venous tumor thrombi, at malalayong metastases na pumipigil sa pagputol, at marami sa mga katangiang ito ay naroroon na sa mga pasyente sa oras ng diagnosis.
Batay sa mga patnubay sa diagnostic at paggamot, ang mga pangunahing salik sa panganib para sa pagbuo ng HCC ay cirrhosis ng atay, talamak na hepatitis B virus (HBV) o impeksyon sa hepatitis C virus (HCV), sakit sa alkohol na mataba sa atay, at non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD). ).2 Bilang karagdagan, ang mga kadahilanan ng panganib para sa HCC ay kinabibilangan ng pagkain na kontaminado ng aflatoxin, schistosomiasis, iba pang mga sanhi ng cirrhosis, isang family history ng kanser sa atay, diabetes, labis na katabaan, paninigarilyo, at pinsala sa atay na dulot ng droga.Ang 35- at 45-taong-gulang na mga grupong may mataas na panganib ay dapat magkaroon ng regular na medikal na check-up.Ang maagang pagsusuri ay isang mahalagang diskarte sa maagang paggamot upang mapabuti ang pangkalahatang kaligtasan ng mga pasyente na may HCC.
Ang mga biomarker tulad ng AFP, AFP-L3 at PIVKA-II ay inirerekomenda para sa maagang pagsusuri ng HCC3,4.Ang mga diskarte sa biopsy ng likido ay nagpakita ng mga magagandang resulta sa maagang pagsusuri at pagsusuri sa paggamot.5,6 Malaking pag-unlad ang nagawa sa HCC liquid biopsy, na maaaring may mas mataas na sensitivity at specificity kaysa sa karaniwang ginagamit na serum marker tulad ng AFP (Talahanayan 1).
Ang AFP ay isang malawakang ginagamit na biomarker sa HCC at kasalukuyang pinakadetalyadong biomarker na malawakang ginagamit para sa maagang pagsusuri, pagsusuri, at pagsusuri ng sakit.Ang patuloy na pagtaas ng antas ng AFP ay itinuturing na isang panganib na kadahilanan para sa pag-unlad ng HCC.7,8 Ang rate ng pagtuklas ng maliit na hepatocellular carcinoma (sHCC) ay tumataas sa pagbuo ng ultrasound at computed tomography, at ang AFP ay natagpuan na partikular na hindi sensitibo sa pagtuklas ng hHCC sa klinikal na kasanayan.Ayon sa isang retrospective multicentre study9, ang AFP positive ay natagpuan sa 46% (616/1338) ng HCC cases at 23.4% (150/641) ng sHCC cases.Bilang karagdagan, ang mga antas ng AFP ay nakataas sa mga pasyenteng may malalang sakit sa atay at cirrhosis.10 Kaya, ang AFP ay may limitadong epekto sa pagsusuri para sa sHCC.11 Ayon sa Asia-Pacific Clinical Practice Guidelines para sa Hepatocellular Carcinoma, ang paggamit ng AFP ay hindi inirerekomenda.12 Ang klinikal na ebidensya ay nagmumungkahi na ang PIVKA-II ay mas mataas kaysa sa AFP sa paggamot ng HCC at na ang kumbinasyon ng PIVKA-II at AFP ay may mas mataas na diagnostic value sa HCC.13 Kung ikukumpara sa tissue biopsy, ang fluid biopsy ay pangunahing nakakakita ng mga metabolite na nauugnay sa tumor sa mga likido ng katawan (dugo, laway, pleural fluid, cerebrospinal fluid, o ihi) at hindi gaanong invasive sa mga tissue.14 Bilang karagdagan, ang mga likidong biopsy ay maaaring magpakita ng mga malignant na tampok na wala sa pangunahing tumor tissue.15 Ang mga likidong biopsy ay hindi pa sinusuri sa klinikal na kasanayan para sa lahat ng uri ng mga tumor, ngunit ang kanilang potensyal na diagnostic sa kanser ay nakakaakit ng atensyon ng mga oncologist.16 Maaaring matukoy ng fluid biopsy ang mga circulating tumor cells (CTCs), circulating tumor DNA (cDNA), circulating free RNA (ecRNA), at exosome.Sa artikulong ito, tatalakayin natin ang mga katangian, papel, at aplikasyon ng iba't ibang mga diskarte sa biopsy ng likido sa maagang pag-screen ng mga high-risk na HCC group.
Ang Extracellular DNA (cfDNA) sa mga sample ng dugo mula sa mga malulusog na indibidwal ay unang inilarawan noong 1948 ni Mandel et al.Ang 17 cfDNA ay isang cell-free na DNA fragment na humigit-kumulang 160–180 bp ang haba, na pangunahing nagmumula sa mga lymphocytes at myeloid cells.Ang ctDNA ay isang partikular na mutant DNA fragment na inilabas ng mga tumor cells sa peripheral blood, na kumakatawan sa genomic na impormasyon ng mga tumor cells pagkatapos ng ilang partikular na proseso ng pathophysiological, kabilang ang nekrosis, apoptosis, at excretion.Ang proporsyon ng ctDNA sa kabuuang cfDNA ay malawak na nag-iiba sa uri ng tumor, at ang mga fragment ng cDNA ay iniulat na karaniwang mas mababa sa 167 bp ang haba.18 Ang pag-aaral ni Underhill ay nagpakita na ang mga fragment ng cfDNA ay karaniwang mas maikli kaysa sa normal na cfDNA.19 Kung ikukumpara sa mga malulusog na indibidwal, ang kabuuang haba ng mga fragment ng cfDNA sa dugo ng mga pasyente ng cancer ay mas maikli, kaya ang cfDNA ay maaaring gamitin bilang isang indicator ng maagang pagsusuri ng tumor.Ang pagpapayaman ng ilang mga subset ng mga haba ng fragment ng cfDNA ay maaaring mapabuti ang pagtuklas ng cDNA na nauugnay sa mga non-metastatic solid tumor.Ipinakita ng mga pag-aaral na ang ctDNA ay matatagpuan sa mahigit 75% ng mga advanced na pancreatic, colon, pantog, gastrointestinal, atay, ovarian, suso, melanoma, at mga kanser sa ulo at leeg.20,21 Gayunpaman, ang dami ng ctDNA sa dugo ay nakasalalay sa lokasyon ng tumor.22 Sa isang pag-aaral ni Bettegoud, ang mga pasyenteng may colorectal, suso, atay, baga, at mga kanser sa prostate ay natagpuan na may mas mataas na antas ng cDNA sa kanilang dugo kaysa sa iba pang mga kanser.Sa kaibahan, sa mga pasyente na may oral cancer, pancreatic cancer, gastric cancer, at glioma, ang konsentrasyon ng cDNA sa dugo ay mas mababa.dalawampu't isa
Dahil naglalaman ang ctDNA ng parehong genetic mutations gaya ng mga pangunahing tumor cells, maaaring gamitin ang cDNA para makita ang mga heterogenous na tumor-specific na mutations at epigenetic na pagbabago, kabilang ang methylation, hydroxymethylation, single nucleotide variation, at copy number variation.dalawampu't tatlo
Ang DNA methylation ay isa sa mga pinakakaraniwang pagbabago sa epigenetic na nagreresulta sa pagsupil sa gene.Kung ikukumpara sa mga normal na selula, may mga pagkakaiba sa pangkalahatang antas ng methylation ng tumor cell genome, lalo na sa methylation ng mga tumor suppressor genes, na maaaring matukoy sa maagang yugto, na nagmumungkahi na ang mga pagbabago sa DNA methylation ay maaaring isang tagapagpahiwatig ng maagang yugto. pagtuklas ng tumorigenesis.Ang mga tumor suppressor genes na nauugnay sa HCC ay maaaring ma-inactivate ng promoter methylation, at sa gayon ay nagpapasigla sa tumorigenesis.24 Ang DNA methylation ay isang mainam na marker para sa maagang pagsusuri ng mga tumor dahil sa pagiging tiyak ng tissue, detectability, at pagsasarili sa edad nito.Bilang karagdagan, ang DNA methylation ay mas karaniwan kumpara sa somatic mutations dahil mas maraming target na rehiyon at ilang binagong CpG site sa bawat rehiyon ng target na genome.25 Bilang karagdagan sa maraming mga site ng CpG, isang malaking bilang ng mga independiyenteng hypermethylated loci sa ctDNA ang nakilala sa DBX2, THY1, MT1M, INK4A, VIM, FBLN1, at RGS10.26 Xu et al.Ang paghahambing ng mga sample ng cfDNA mula sa 1098 na mga pasyente ng HCC at 835 na malusog na kontrol ay ang mga gene na nauugnay sa HCC ay natagpuang malakas na nauugnay sa kaukulang mga pirma ng plasma cDNA methylation.25 Batay sa pagsusuri sa laboratoryo, ang isang predictive na modelo ay binuo na naglalaman ng 10 methylation marker na may sensitivity at specificity na 85.7% at 94.3%, ayon sa pagkakabanggit, at ang mga marker na ito ay lubos na nakakaugnay sa tumor mass, tumor stage, at tugon sa paggamot.Ang mga resultang ito ay nagpapahiwatig na ang paggamit ng mga cDNA methylation marker ay may malaking pangako sa pagsusuri, pagsubaybay, at pagbabala ng HCC.Sa isang methylation model na binubuo ng tatlong aberrantly methylated genes (APC, COX2, RASSF1A) at isang miRNA (miR203) na ipinakita ni Lu et al27, ang sensitivity at specificity ng model 27 para sa pag-diagnose ng HBV-associated HCC ay maihahambing.80%.Bilang karagdagan, maaaring makita ng modelo ang 75% ng mga hindi natukoy na pasyente ng HCC na may antas ng AFP na 20 ng/mL.Ang gene para sa Ras-associated domain family 1A protein (RASSF1A) ay ang pangunahing paulit-ulit na pagkakasunud-sunod ng DNA sa genome ng tao.Araujo et al.Napagpasyahan na ang hypermethylation ng RASSF1A promoter ay maaaring maging isang mahalagang biomarker para sa maagang screening ng HCC at isang potensyal na target na molekular para sa epigenetic therapy.28 Sa isang pag-aaral, ang serum RASSF1A promoter hypermethylation ay natagpuan sa 73.3% ng mga pasyente na may HCC.29 Ang mahabang interspersed nucleotide element 1 (LINE-1) ay isa pang aktibong tagapamagitan ng retrotransposition.Ang hypomethylation ng LINE-1 ay natagpuan sa DNA ng 66.7% ng mga sample ng HCC serum at nauugnay sa maagang pag-ulit at mahinang kaligtasan pagkatapos ng radikal na pagputol.29 Ang hypermethylation ay isang pangkaraniwang genetic na proseso na gumaganap ng kakaibang papel sa pagbuo ng liver cirrhosis at HCC.30 Sa kabaligtaran, ang hydroxymethylation ay isang proseso ng demethylation na nag-uudyok sa muling pag-activate at pagpapahayag ng gene, at ang pagtuklas ng produktong 5-hydroxymethylcytosine (5-hmC) sa prosesong ito ay maaaring gamitin upang makilala ang isang tumor.Ang methylation at hydroxymethylation ng cDNA ay nauugnay sa tumorigenesis at maaaring mag-ambag sa maagang screening ng HCC.Sa isang pag-aaral ng 2554 na paksa, 31 genome-wide 5-hmCs ang natagpuan sa mga sample ng cfDNA, at 32 genes ang natukoy sa pamamagitan ng paghahambing ng 5-hmC sequence sa mga pasyente ng HCC at mga high-risk na grupo tulad ng mga may malalang sakit.Mga modelo ng diagnostic ng mga sakit sa atay.at cirrhosis.Ang modelong ito ay nakahihigit sa AFP sa pagkilala sa HCC mula sa non-tumor tissue.
Ang mga mutasyon sa mga rehiyon ng coding ay maaaring humantong sa mga abnormalidad ng transkripsyon, na maaaring humantong sa mga pagbabago sa mga pagkakasunud-sunod ng protina at sa huli ay cancer.Ang mga solong variant ng nucleotide ay mahalagang mga genomic marker para sa maagang pag-screen ng tumor dahil sa kanilang mataas na pagiging maaasahan ng tissue at mataas na pagtitiyak ng tumor at tissue.Maraming mga pag-aaral na nauugnay sa HCC gamit ang susunod na henerasyon na pagkakasunud-sunod (NGS) para sa exome at buong genome na pagkakasunud-sunod ng cancer ay nakilala ang mga karaniwang mutated cellular genes tulad ng TP53 at CTNNB1, pati na rin ang ilan kasama ang ARID1A, MLL, IRF2.Ang mga bagong gene, ATM, CDKN2A, FGF19, PIK3CA, RPS6KA3 at JAK1 ay nagpapakita ng katamtamang mga rate ng mutation. Iminumungkahi ng pagsusuri ng mutant gene function na ang mga pagbabago sa chromatin remodeling, Wnt/β-catenin at JAK/STAT signal transduction, ang P53-cell cycle pathway, epigenetic modifiers, oxidative stress pathways, ang PI3K/AKT/MTOR pathway at ang RAS/RAF/ Ang MAPK kinase pathway ay may mahalagang papel sa HCC oncogenesis.32,33 Sa isang pag-aaral kung saan nakita ang mga mutasyon na nauugnay sa tumor, natagpuan ni Huang et al na ang dalas ng mga mutasyon na nauugnay sa tumor na nakasalalay sa ctDNA ay 19.5%, at ang pagtitiyak ay 90% .34 Sa karagdagan, ang mga pasyenteng nakaranas ng vascular invasion ay mas malamang na magkaroon ng ctDNA mutations (P=0.041) at mas maikli ang recurrence-free survival (P<0.001). Iminumungkahi ng pagsusuri ng mutant gene function na ang mga pagbabago sa chromatin remodeling, Wnt/β-catenin at JAK/STAT signal transduction, ang P53-cell cycle pathway, epigenetic modifiers, oxidative stress pathways, ang PI3K/AKT/MTOR pathway at ang RAS/RAF/ Ang MAPK kinase pathway ay may mahalagang papel sa HCC oncogenesis.32,33 Sa isang pag-aaral kung saan nakita ang mga mutasyon na nauugnay sa tumor, natagpuan ni Huang et al na ang dalas ng mga mutasyon na nauugnay sa tumor na nakasalalay sa ctDNA ay 19.5%, at ang pagtitiyak ay 90% .34 Sa karagdagan, ang mga pasyenteng nakaranas ng vascular invasion ay mas malamang na magkaroon ng ctDNA mutations (P=0.041) at mas maikli ang recurrence-free survival (P<0.001).Iminumungkahi ng pagsusuri ng mutant gene function na ang mga pagbabago sa chromatin remodeling, Wnt/β-catenin at JAK/STAT signaling, P53 cell cycle pathway, epigenetic modifier, oxidative stress pathway, PI3K/AKT/MTOR pathway, at RAS/RAF/MAPK kinase pathway ay gumaganap isang kritikal na papel sa HCC tumorigenesis.32,33 Sa isang pag-aaral na natagpuan ang mga mutasyon na nauugnay sa tumor, Huang et al.natagpuan na ang dalas ng ctDNA-dependent tumor-associated mutations ay 19.5% at ang specificity ay 90%.. .34 Bilang karagdagan, ang mga pasyente na may vascular invasion ay may mas maraming cDNA mutations (P=0.041) at isang mas maikling kaligtasan ng walang sakit (P<0.001).Ang functional analysis ng mutant genes ay nagsiwalat ng chromatin remodeling, Wnt/β-catenin at JAK/STAT signaling, ang P53 cell cycle pathway, epigenetic modifiers, ang oxidative stress pathway, ang PI3K/AKT/MTOR pathway, at ang RAS/RAF/MAPK Ang kinase pathway ay gumaganap ng isang kritikal na papel sa oncogenesis ng HCC. 32,33 在 一 项 检测 到 肿瘤 相关 突变 的 研究 中 ， huang 等 人 发现 肿瘤 相关 突变 依赖于 ctdna 的 频率 为 19.5% ， 为 90% .34 此外 ， 经历 血管 侵犯 患者 患者 更 有 可能 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生突变（P=0.041）和更短的无复发生存期（P<0.001）。 32.33 在 一 项 检测 到 相关 突变 的 研究 ， huang 等 发现 肿瘤 相关 突变 依赖于 ctdna 的 为 为 19.5% ， 特异性 为 90% .34 此外 经历 血管 侵犯 的 更 可能 发生 ctdna 突变 （p = 0.041） 和 可能 可能 发生 发生 发生 突变 （p = 0.041） 和 可能短的无复发生存期（P<0.001）。32,33 Sa isang pag-aaral na natagpuan ang mga mutasyon na nauugnay sa tumor, Huang et al.natagpuan na ang mga mutasyon na nauugnay sa tumor ay 19.5% na nakasalalay sa cDNA na may tiyak na 90% 34. Bilang karagdagan, ang mga pasyente na sumailalim sa vascular invasion ay mas malamang na magkaroon ng cDNA.мутация (P = 0,041) at более короткая безрецидивная выживаемость (P <0,001). mutation ( P = 0.041) at mas maikling kaligtasan ng walang sakit ( P <0.001).Ang isa pang karaniwang HCC driver gene ay TP53, na may mutation rate na higit sa 30%.Ipinakita ng mga pag-aaral na ang dalas ng mga mutasyon ng TP53 sa ctDNA sa dugo at ihi ay mula 5% hanggang 60%.35 Ang pag-aaral ni Johan ay nagpakita na ang ctDNA mutation spectrum sa huling bahagi ng HCC ay may katulad na mutation rate sa unang bahagi ng HCC, kabilang ang TERT promoter (51%), TP53 (32%), CTNNB1 (17%), PTEN (8%), mutations sa AXIN1 ., ARID2, KMT2D at TSC2 (6% bawat isa).36 Ang β-catenin (CTNNB1) oncogene ay gumaganap ng mahalagang papel sa Wnt signaling pathway.Ang transcription coactivator CTNNB1 ay maaaring magsulong ng pagpapahayag ng gene, na maaaring humantong sa paglaganap ng cell, pagsugpo ng apoptosis, at angiogenesis.Ang CTNNB1 ay maaari ring makipag-ugnay sa TERT upang mapukaw ang pagbabagong-anyo ng hepatocyte.33 Ang tagataguyod ng TERT ay madalas na na-mutate sa ilang mga solidong tumor.Ang mga pagbabago sa TERT, isa sa mga pinakaunang genetic na pagbabago sa malignant na pagbabagong-anyo ng HCC, ay maaaring humantong sa telomerase reactivation sa cirrhotic hepatocytes at maaaring magsulong ng paglaganap at maiwasan ang pagtanda.Ang mga mutasyon sa 33-37 TERT promoter ay naiulat na nangyari sa 59-90% ng mga pasyente na may proliferative liver nodules at maagang HCC at nauugnay sa kaligtasan ng buhay.38
Ang mga pagbabago sa numero ng kopya (CNA) ay isang mahalagang subtype ng somatic mutations.Ipinakita ng pananaliksik na ang laganap at nakatutok na pasanin ng CNA ay isang genomic signature na may kakayahang hulaan ang tumor immune infiltration at pagbubukod sa ilang uri ng cancer.39 Aktibong infiltration signaling, mataas na aktibidad ng cytolytic, matinding pamamaga at genetic marker na nauugnay sa antigen presentation sa HCC.Ang pagsusuri sa hanay ng data ng solong nucleotide polymorphism sa 477 na paksa ay nagsiwalat ng mababang pasanin sa CNS.Sa kaibahan, ang mga chromosomally unstable na tumor na may mataas na malawak na CNA load ay nagpakita ng mga palatandaan ng immune rejection at nauugnay sa paglaganap, pag-aayos ng DNA, at TP53 dysfunction.Xu et al.ay nagpakita na ang pangkat ng HCC ay may mas mataas na mga marka ng CNA kaysa sa talamak na pangkat ng sakit sa atay.40 Gamit ang buong-genome na pagkakasunud-sunod ng isang solong cell, ang mga CNA ay natagpuan na lumitaw nang maaga sa hepatocarcinogenesis at nananatiling medyo matatag sa panahon ng pag-unlad ng tumor.41 Chung et al.natagpuan na ang mga antas ng cfDNA ay makabuluhang nakataas sa mga pasyente ng HCC at ang mga genome-wide CNA sa cfDNA ay isang mahalagang independiyenteng prognostic marker sa mga pasyente ng HCC na ginagamot ng sorafenib.42 Ang mga pasyente na may mas mataas na pasanin ng CNA ay mas malamang na magkaroon ng paglala ng sakit at kamatayan kaysa sa mga may mas mababang pasanin ng CNA.Ollerich et al.natagpuan na ang copy number instability index (CNI) ay maaaring gamitin upang masuri ang CNA sa cfDNA ng mga pasyente ng cancer.Napansin nila na ang mga pasyente na may advanced na kanser ay may mas mataas na mga marka ng CNI kaysa sa isang control group, na tinatasa ang tugon ng pasyente sa systemic chemotherapy at immunotherapy.43 Iminumungkahi ng mga resultang ito na ang mga CNA na matatagpuan sa mga liquid biopsy specimen ay maaaring magsilbing prognostic indicator sa mga pasyenteng may advanced na cancer.HCC sa background ng systemic therapy.
Sa kasalukuyan, ang mga pamamaraan na ginamit upang makita ang ctDNA ay maaaring nahahati sa mga naka-target at hindi naka-target na mga pamamaraan.Sa madaling sabi, ang mga naka-target na pamamaraan tulad ng digital polymerase chain reaction (dPCR), BEAMing digital PCR, Amplification Refractory Mutation System-PCR, Capp-Seq at Tam-Seq ay lubos na sensitibo sa mga paunang natukoy na gene.Ang mga off-target na pamamaraan tulad ng buong genome sequencing at NGS ay nagbibigay ng komprehensibong view ng buong genomic landscape.44 Kung ikukumpara sa mga target na panel, ang buong genome sequencing ay makaka-detect hindi lamang ng mga point mutations at insertions, kundi pati na rin ang mga rearrangements at copy number variations.pagbabala, at CTC at cfDNA ay mahusay na mga tagapagpahiwatig na maaaring magamit para sa dynamic na pagsubaybay ng HCC.45 Bilang karagdagan, ang pagsusuri ng cfDNA ay maaaring maging mas kapaki-pakinabang sa pag-detect ng HCC.Yan et al.nagpakita na ang cfDNA sa plasma ng mga pasyente na may HCC ay makabuluhang mas mataas kaysa sa mga pasyente na may fibrosis ng atay at malusog na mga kontrol.Kung ikukumpara sa AFP, ang ctDNA ay inaasahang maging mas mahusay na screening marker para sa maagang HCC.46 Sa isang inaasahang pag-aaral ng 47 likidong biopsy na sumubok ng cfDNA at protina sa isang populasyon ng populasyon, ipinakita ang mga ito na epektibo sa pag-iiba ng mga pasyenteng may HCC mula sa mga pasyenteng walang HCC.Sa isang follow-up ng 331 ultrasound normal at AFP-negative na mga pasyente, ang sensitivity at specificity ng cfDNA para sa pag-diagnose ng HCC ay 100% at 94%, ayon sa pagkakabanggit, kaya ang cDNA ay maaaring makakita ng HCC sa asymptomatic HBsAg seropositive na mga indibidwal.Sa pag-aaral ng Yeo48, ang isang mataas na dalas (92.5%) ng hypermethylation ng RASSF1A promoter ay natagpuan sa mga pasyente na may HCC.Bilang karagdagan, si Xu et al.lumikha ng diagnostic na modelo upang mahulaan ang HCC gamit ang isang panel ng mga partikular na marker ng methylation na may specificity at sensitivity na 90.5% at 83.3%, ayon sa pagkakabanggit.Ang panel ay nagpapahintulot sa mga pasyente na may HCC na makilala mula sa mga pasyente na may iba pang mga sakit sa atay, na mas mahusay kaysa sa AFP.Nalaman din nila na ang mga normal na kontrol na nasubok na positibo ay maaaring may mga kadahilanan ng panganib para sa HCC, tulad ng impeksyon sa HBV o isang kasaysayan ng paggamit ng alkohol.25 Ipinagpalagay namin na ang mga kadahilanan na may mataas na peligro para sa HCC ay maaaring magsulong ng hypermethylation ng cfDNA, na pagkatapos ay nag-aambag sa pag-unlad ng HCC, at sa gayon ang cfDNA ay maaaring gumanap ng isang mahalagang papel sa pag-screen para sa mga pangkat na may mataas na peligro.Cai et al.ibuod ang buong hanay ng mga mutasyon ng ctDNA at nag-aalok ng isang matatag na diskarte para sa pagtatasa ng pasanin ng tumor sa mga pasyente.49 Ang diskarteng ito ay maaaring makilala ang tumorigenesis isang median ng 4.6 na buwan bago ang pagbabago ng imaging at nagpakita ng higit na mahusay na pagganap ng diagnostic kumpara sa mga serum biomarker na AFP, AFP-L3, at PIVKA-II.Ang diagnostic value ng cDNA testing ay naipakita kapag ang image evaluation ay hindi available, kaya ang cDNA testing ay may halaga sa diagnosis ng maagang HCC sa mga high-risk group.Kamakailan, ginamit ng mga siyentipiko ang teknolohiya ng NGS upang pag-aralan ang mga tagapagpahiwatig ng multivariate genetic variation (kabilang ang 5-hydroxymethylcytosine, 5′-motif, fragmentation, nucleosome trace, HIFI) sa 3204 na klinikal na sample at cfDNA.50 Re-validated HIFI models na may tatlong independent train, test, at test sets ay nagpakita ng matatag at maaasahang diskriminasyon sa pagitan ng HCC at non-HCC na populasyon na may 95.79% at 95.42% sensitivity sa HCC-specific test at test sets, ayon sa pagkakabanggit.Ang mga kasarian ay 95.00% at 97.83%, ayon sa pagkakabanggit.Ang diagnostic value ng HIFI method ay mas mataas kaysa sa AFP sa pagkilala sa HCC mula sa cirrhosis.Bilang karagdagan, ang ctDNA ay ginagamit din sa kirurhiko paggamot.Atsushi et al.natukoy ang preoperative serum na antas ng ctDNA sa mga pasyente na may HCC at natagpuan na ang rate ng pag-ulit at ang extrahepatic metastasis rate sa cDNA positive group ay makabuluhang mas mataas kaysa sa cDNA negatibong grupo, at ang mga antas ng cDNA ay makabuluhang nakakaugnay.na may pag-unlad ng tumor.51 Bilang isang napakasensitibong biomarker, mahuhulaan ng ctDNA ang kakayahan ng HCC na salakayin ang mga sisidlan.Wang et al.nagsagawa ng buong genome sequencing ng 46 na pasyente na may HCC, at ipinakita ng multivariate analysis na ang threshold value ng allele frequency ng cDNA variant para sa invasion sa microvessels ay 0.83%, sensitivity 89.7% at specificity 80.0%.isang independiyenteng kadahilanan ng panganib para sa microvascular invasion sa resectable HCC, na nagmumungkahi na ang cDNA ay maaaring makatulong na gabayan ang pinakamainam na paggamot.Sa konklusyon, ang ctDNA ay ganap na nasangkot sa paglitaw at pag-unlad ng HCC at maaaring magamit para sa maagang screening, surgical evaluation, at pagsubaybay sa sakit.
Ang mga CTC ay mga malignant na selula na nagmula sa mga pangunahing tumor o metastases na nag-metastasis sa daluyan ng dugo.Ang mga selula ng tumor ay naglalabas ng matrix metalloproteinases (MMPs), na sumisira sa basement membrane, na nagpapahintulot sa mga selulang tumor na direktang pumasok sa mga daluyan ng dugo at lymph.Gayunpaman, karamihan sa mga CTC ay mabilis na inaalis ng anoikis, immune attack, o shear stress.53 Ang epithelial-mesenchymal transition (EMT) ay nagbibigay-daan sa mga CTC na madaling ihiwalay mula sa pangunahing tumor tissue, salakayin ang mga capillary, at makakuha ng makabuluhang pinabuting kaligtasan, metastasis, invasiveness, at paglaban sa droga.Ipinakita ng mga pag-aaral na mayroong malalim na heterogeneity sa iba't ibang mga selula ng tumor sa mga pangunahing metastatic na tumor.Kaya, ang pagsusuri ng CTC ay maaaring humantong sa isang komprehensibong pag-unawa sa heterogeneity ng tumor cell.54
Ang mga partikular na marker para sa HCC-associated CTCs ay kinabibilangan ng glypican-3 (GPC3), asialoglycoprotein receptor (ASGPR), epithelial cell adhesion molecule (EpCAM) at stem cell-associated marker tulad ng CD44, CD90, 55 at intercellular adhesion molecule 1 (ICAM1).) .56 Ang GPC3 marker ay isang cell membrane-anchored protein na klinikal na ginagamit para sa pathological analysis at characterization ng HCC.57 Ang pagpapahayag ng GPC3 ay mas karaniwan sa mga selulang tumor ng HCC na may intermediate at mababang pagkakaiba at nagtataguyod ng extrahepatic na paglipat;bilang karagdagan, ang pagkakaroon ng GPC3+ CTCs ay nagpapahiwatig ng metastatic HCC.58 Ang ASGPR ay isang transmembrane na protina na ipinahayag lamang sa ibabaw ng mga hepatocytes at lubos na ipinahayag sa mahusay na pagkakaiba-iba ng HCC.Ang EpCAM ay isa sa mga pinakakaraniwang ginagamit na protina na nauugnay sa lamad upang makuha ang mga CTC.Ang EpCAM ay nakilala bilang isang marker sa ibabaw ng mga selula ng HCC na may mga katangian ng stem cell, 59 na nauugnay sa iba't ibang mga tampok na clinicopathological ng HCC, tulad ng vascular invasion, tinasa ang mga antas ng AFP, at advanced na yugto ng kanser sa atay sa Barcelona Hospital (BCLC).Ang 60 CTC EMT phenotype ay lubos na metastatic.Ang 54 na mga proseso ng EMT sa CTC ay nagtataguyod ng HCC metastasis.Ang pagpapahayag ng mga EMT marker tulad ng vimentin, twist, E-box zinc finger binding (ZEB) 1, ZEB2, snail, slug, at E-cadherin ay pinag-aralan sa mga CTC na nagmula sa atay mula sa mga pasyente ng HCC.58 Ang CanPatrol™ system na binuo ni Cheng [61] ay inuri ang mga CTC sa tatlong phenotypic na subgroup batay sa nakararami na ipinahayag na mga marker: epithelial phenotype (EpCAM, CK8/18/19), mesenchymal phenotype (vimentin, coiled), at mixed phenotypes.Sa 176 na mga pasyente, ang kabuuang CTC ay higit na mataas sa AFP sa pagkakaiba-iba ng HCC mula sa benign na sakit sa atay.Ang mga halaga ng AUC para sa kabuuang CTC, AFP, at pinagsamang kabuuang CTC at AFP ay 0.774 (95% CI, 0.704–0.834), 0.669 (95% CI, 0.587–0.750), at 0.821 (95% CI, 0.756–0.886 ).), ayon sa pagkakabanggit.Ang pag-uuri ng CTC batay sa EMT ay maaaring mahulaan ang HCC diagnosis, maagang pag-ulit, metastasis, at mas maikling pangkalahatang oras.
Sa kasalukuyan, ang mga pamamaraan para sa pag-detect ng mga CSC ay kinabibilangan ng mga pisikal na pamamaraan at biological na pamamaraan.Ang mga pisikal na pamamaraan, na kadalasang tinutukoy bilang pagpapayaman batay sa mga biophysical na katangian, ay higit sa lahat ay nakadepende sa mga pisikal na katangian ng CSC, tulad ng laki, densidad, singil, kadaliang kumilos at deformability.Depende sa mga pisikal na katangian, mayroong iba't ibang mga pamamaraan tulad ng mga sistemang nakabatay sa pagsasala, dielectrophoresis, atbp. Ang huli, na kilala rin bilang pagpapayaman na nakabatay sa immunoaffinity, ay pangunahing nakabatay sa pagbubuklod ng antigen-antibody dahil ang pamamaraan ay gumagamit ng mga antibodies laban sa mga biomarker na partikular sa tumor tulad ng EpCAM, ASGPR, human epidermal growth factor receptor 2 (HER2), prostate specific antigen (PSA), human pancytokeratin (P-CK) at carbamoyl phosphate synthase 1 (CPS1).62 Ang isa pang uri, na tinatawag na no-enrichment method, ay gumagamit ng flow cytometry upang ibahin ang mga CTC mula sa mga leukocytes batay sa mas mataas na nuclear-to-cytoplasmic ratio at laki.Sa kasalukuyan, ang tanging inaprubahan ng FDA na pagsubok para sa pagtuklas ng mga CTC ay ang Cell-Search™ system, na gumagamit ng EpCAM cell surface marker. Gayunpaman, ang pinagsamang pagtuklas ng CTC na nakabatay sa mga marker ay maaaring tumaas ang rate ng positivity.54 Ang isang halo ng mga antibodies laban sa ASGPR at CPS1 ay nakamit ang isang rate ng pagtuklas ng CTC na 91% sa mga pasyente ng HCC.63 Gumamit si Zhang et al ng isang CTC-Chip na may mga antibodies laban sa ASGPR, P -CK at CPS1, at pinag-iba ang mga pasyente ng HCC mula sa mga may benign liver disease o non-HCC cancer sa rate na 100%.64 Natuklasan ng isang pag-aaral ni Wang ang mga EpCAM+ CTC sa 60% ng 42 na pasyente ng HCC at nakakita ng makabuluhang ugnayan sa pagitan ng parehong positibo. rate at ang bilang ng mga CTC na may yugto ng TNM.65 Nalaman ni Guo et al na ang marka ng PCR na nagmula sa CTC ay tumaas sa 125/171 (73%) na mga pasyente na ang antas ng AFP ay <20 ng/mL na may sensitivity na 72.5% at isang specificity ng 95.0%, kumpara sa 57.0% at 90.0% para sa AFP sa cutoff na 20 ng/mL.66 Ang kumbinasyon ng AFP at CTCs ay maaaring mapabuti ang HCC detection.45 Ito ay pinaniniwalaan na ang CTCs ay may kalamangan sa AFP sa maagang screening ng mga grupo sa mataas na panganib para sa HCC. Gayunpaman, ang pinagsamang pagtuklas ng CTC na nakabatay sa mga marker ay maaaring tumaas ang rate ng positivity.54 Ang isang halo ng mga antibodies laban sa ASGPR at CPS1 ay nakamit ang isang rate ng pagtuklas ng CTC na 91% sa mga pasyente ng HCC.63 Gumamit si Zhang et al ng isang CTC-Chip na may mga antibodies laban sa ASGPR, P -CK at CPS1, at pinag-iba ang mga pasyente ng HCC mula sa mga may benign liver disease o non-HCC cancer sa rate na 100%.64 Natuklasan ng isang pag-aaral ni Wang ang mga EpCAM+ CTC sa 60% ng 42 na pasyente ng HCC at nakakita ng makabuluhang ugnayan sa pagitan ng parehong positibo. rate at ang bilang ng mga CTC na may yugto ng TNM.65 Nalaman ni Guo et al na ang marka ng PCR na nagmula sa CTC ay tumaas sa 125/171 (73%) na mga pasyente na ang antas ng AFP ay <20 ng/mL na may sensitivity na 72.5% at isang specificity ng 95.0%, kumpara sa 57.0% at 90.0% para sa AFP sa cutoff na 20 ng/mL.66 Ang kumbinasyon ng AFP at CTCs ay maaaring mapabuti ang HCC detection.45 Ito ay pinaniniwalaan na ang CTCs ay may kalamangan sa AFP sa maagang screening ng mga grupo nasa mataas na panganib para sa HCC.Gayunpaman, ang pinagsamang pagtuklas ng mga CTC na nakabatay sa marker ay maaaring tumaas ang porsyento ng mga positibong resulta.54 Ang pinaghalong anti-ASGPR at CPS1 na mga antibodies ay nakamit ang rate ng pagtuklas ng CTC na 91% sa mga pasyenteng may HCC.63 Zhang et al.gumamit ng CTC-Chip na may mga antibodies laban sa ASGPR, P-CK at CPS1, at nakilala rin ang mga pasyenteng may HCC mula sa mga may benign liver disease o non-HCC sa rate na 100%.частота и количество ЦОК со стадией TNM.65 Guo и соавторы обнаружили, что показатель ПЦР, полученный из ЦОК, был повышен у 125/171 (73%) пациентов, у которых уровень АФП был <20 нг/мл с чувствительностью 72,5% и специфичность 95,0% по сравнению с 57,0% и 90,0% для АФП при пороговом уровне 20 нг/мл.66 Комбинация АФП и ЦОК может улучшить обнаружение ГЦК.45 Считается, что ЦОК имеют преимущество перед АФП при раннем скрининге групп. dalas at bilang ng mga CTC na may yugto ng TNM. 65 Nalaman ni Guo et al na ang PCR na nagmula sa mga CTC ay tumaas sa 125/171 (73%) na mga pasyente na may mga antas ng AFP na <20 ng/mL na may sensitivity na 72.5% at isang partikularidad ng 95.0% kumpara sa 57.0% at 90.0% para sa AFP sa cut-off level na 20 ng/mL.66 Ang kumbinasyon ng AFP at CTCs ay maaaring mapabuti ang pagtuklas ng HCC.45 CTCs ay itinuturing na may kalamangan sa AFP sa maagang screening mga pangkat.na may mataas na panganib ng HCC.Gayunpaman, ang pinagsamang pagtuklas na batay sa marker ng mga CTC ay maaaring tumaas ang porsyento ng mga positibong resulta.54 Ang pinaghalong anti-ASGPR at CPS1 antibodies ay nakamit ang 91% CTC detection rate sa mga pasyenteng may HCC.63 Zhang et al.gumamit ng CTC chips na may mga antibodies laban sa ASGPR, P-CK at CPS1 at mga kilalang pasyente na may HCC mula sa benign liver disease at non-HCC na may 100%.64 Tinukoy ng pag-aaral ni Wang ang 60% ng mga EpCAM+ CTC sa 42 na pasyente ng HCC at natagpuan ang isang makabuluhang ugnayan sa pagitan ng saklaw at bilang ng mga CTC sa yugto ng TNM. 65 Guo 等人发现，在AFP 水平<20 ng/mL 的125/171 (73%) 名患者中，CTC 衍生的PCR 评分升高，敏分升高，敏分升高，敏分升高，敏亄中有7.值为20 ng/mL 时的特异性为57.0% 和90.0%. 65 GUO 等 人 发现 在 在 在 水平截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止值 为 20ng/ml 时 的 特异性 为 57.0% 和 90.0%。65 Guo et al.обнаружили, что у 125/171 (73%) пациентов с уровнем АФП <20 нг/мл показатели ПЦР, полученные с помощью ЦОК, были повышены с чувствительностью 72,5% и специфичностью 95,0%, в то время как АФП на уровне отсечки Специфичность составляла 20 нг/мл. natagpuan na sa 125/171 (73%) mga pasyente na may mga antas ng AFP na <20 ng/mL, ang mga halaga ng PCR na nagmula sa CTC ay tumaas na may sensitivity na 72.5% at isang specificity na 95.0%, habang ang AFP ay nasa cut-off specificity. ay 20 ng/mL.ml ay 57.0% at 90.0%.66 Ang kumbinasyon ng ORP at CTC ay nagpapabuti sa pagtuklas ng HCC.45 CTCs ay naisip na mas mataas kaysa sa AFP sa maagang pag-screen ng mga high-risk na populasyon ng HCC.Kaya, para sa CTC-positive at high-risk na HCC group, ang CTC testing ay dapat na regular na isama sa ultrasound at AFP detection.Gayunpaman, ang mga CTC ay itinuturing na mahalagang mga predictors ng tumor metastasis at pag-ulit, at ang pagtuklas ng mga CTC ay hindi independiyenteng inirerekomenda bilang isang diagnostic tool.62 Samakatuwid, ang CTC ay maaaring magsilbi bilang isang mas mahusay na predictive biomarker kaysa sa iba pang kasalukuyang ginagamit na mga marker. Nalaman ni Zhou et al na ang mga pasyente na may mataas na bilang ng EpCAM+ CTC at regulatory T cells ay nagpakita ng mas mataas na panganib na magkaroon ng HCC recurrence, kaysa sa mga may mababang bilang ng CTC, na may recurrence ratio na 66.7% kumpara sa 10.3% (P <0.001).67 Ang isang katulad na pag-aaral ay iniulat ni Zhong et al.68 Bilang karagdagan, natagpuan ng Qi na 101 sa 112 na pasyente (90.81%) na may HCC, kabilang ang mga may sakit sa maagang yugto, ay positibo para sa mga CTC at ang napakaliit na HCC nodules ay nakita pagkatapos ng 3 hanggang 5 buwan ng follow-up. Nalaman ni Zhou et al na ang mga pasyente na may mataas na bilang ng EpCAM+ CTC at regulatory T cells ay nagpakita ng mas mataas na panganib na magkaroon ng HCC recurrence kaysa sa mga may mababang bilang ng CTC, na may recurrence ratio na 66.7% kumpara sa 10.3% (P <0.001).67 A ang katulad na pag-aaral ay iniulat ni Zhong et al.68 Bilang karagdagan, natuklasan ni Qi na 101 sa 112 na pasyente (90.81%) na may HCC, kabilang ang mga may sakit sa maagang yugto, ay positibo para sa mga CTC at ang napakaliit na HCC nodule ay nakita pagkatapos ng 3 hanggang 5 buwan ng follow-up. Чжоу и др.обнаружили, что у пациентов с повышенным количеством ЦОК EpCAM+ и регуляторных Т-клеток риск развития рецидива ГЦК был выше, чем у пациентов с низким количеством ЦОК, с коэффициентом рецидивов 66,7% против 10,3% (P <0,001)67. Natagpuan ni Zhou et al na ang mga pasyente na may mataas na EpCAM+ CTC at regulatory T cells ay may mas mataas na peligro ng pag-ulit ng HCC kaysa sa mga may mababang CTC, na may rate ng pag-ulit na 66.7% kumpara sa 10.3% (P<0.001 )67.Ang isang katulad na pag-aaral ay isinagawa ni Zhong et al.68. Bilang karagdagan, nalaman ni Qi na 101 sa 112 na pasyente (90.81%) na may HCC, kabilang ang mga may maagang sakit, ay may mga CTC, at ang napakaliit na HCC nodule ay nakita pagkatapos ng 3 hanggang 5 buwan ng pag-follow-up. Zhou 等 人 发现 ， 与 ctc 数量 较 少 的 患者 相比 ， epcam+ ctc 和 调节性 t 细胞 数量 升高 的 发生 发生 hcc 复发 的 风险 更 高 ， 复发率 分别 为 66.7% 和 10.3% (p <0.001)。 分别 为 66.7% 和 10.3% (p <0.001)。 Zhou 等 人 发现 与 与 ctc 数量 少 的 患者 相比 ， ， epcam+ ctc 和 t 细胞 数量 的 患者 发生 hcc 复发 风险 更 复发率 分别 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为p <0.001) . . . . . . . . . . Чжоу и др.обнаружили, что пациенты с повышенным количеством ЦОК EpCAM+ и регуляторных Т-клеток имели более высокий риск рецидива ГЦК по сравнению с пациентами с меньшим количеством ЦОК, с частотой рецидивов 66,7% и 10,3% соответственно (P <0,001). Zhou et al.natagpuan na ang mga pasyente na may mataas na EpCAM+ CTC at regulatory T cells ay may mas mataas na peligro ng pag-ulit ng HCC kumpara sa mga pasyente na may mas kaunting mga CTC, na may mga rate ng pag-ulit na 66.7% at 10.3%, ayon sa pagkakabanggit (P <0.001).Ang isang katulad na pag-aaral ay iniulat ni Zhong et al.68 Bilang karagdagan, nalaman ni Qi na 101 sa 112 na pasyente ng HCC (90.81%), kabilang ang mga pasyenteng may maagang sakit, ay may positibong resulta ng CTC at nakakita ng napakaliit na HCC nodules pagkatapos ng 3 pagbisita.Pagmamasid hanggang 5 buwan.Nakakita rin sila ng mga CTC sa 12 pasyenteng may talamak na impeksyon sa HBV at nakakita ng maliliit na HCC tumor sa loob ng 5 buwan sa 2 pasyenteng positibo sa CTC.69 Kaya, ang mga CTC ay maaaring gamitin upang mahulaan ang HCC, 70 ngunit maaari silang magamit nang mas regular bilang mga predictive biomarker.
Tulad ng cfDNA, ang cfRNA ay inilabas sa daluyan ng dugo sa pamamagitan ng iba't ibang sistema.Ang mga molecule na ito sa peripheral blood ay kumakatawan sa cancerous tissue na pinagmulan.Kung ikukumpara sa mga marker na nakita ng mga non-invasive na pamamaraan, ang mga cfRNA ay mas dynamic na kinokontrol, tissue-specific, at sagana sa extracellular na kapaligiran.Ang kahalagahan at diagnostic na halaga ng 71 miRNAs (miRNAs) sa HCC ay naiulat sa maraming pag-aaral.Ang mga miRNA ay mga endogenous non-coding RNAs (ncRNAs) na kumokontrol sa iba't ibang molecular biological na aktibidad sa pamamagitan ng pagpigil sa pagsasalin ng mga target na messenger RNAs (mRNAs).Ang mga miRNA ay matatagpuan sa mga apoptotic na katawan na naka-encapsulated sa mga exosome, ngunit maaari rin silang matatag na magbigkis sa mga serum na protina at lipid sa peripheral na dugo at maaaring magamit upang suriin ang HCC.Ang mga microRNA ay kasangkot sa pagbabagong-buhay ng atay, metabolismo ng lipid, apoptosis, pamamaga, at pag-unlad ng HCC.72 Oncogenic miRNA tulad ng miR-21, miR-155 at miR-221 ay kilala sa HCC.Sa partikular, ang miR-21 ay gumaganap ng isang pangunahing papel sa synthesis ng collagen sa extracellular matrix at fibrosis at nagtataguyod ng hepatocarcinogenesis sa pamamagitan ng pag-activate ng mga hematopoietic stem cell.Kasama sa 72,73 Tumor suppressor miRNA sa HCC ang miRNA-122, miRNA-29, ang Let-7 na pamilya, at ang miRNA-15 na pamilya.Ang pamilyang Let-7 ay binubuo ng maraming tumor suppressor miRNA na nagta-target sa pamilya ng RAS.Kasama sa pamilya ng miR-15 ang miR-15a, miR-15b, miR-16, miR-195, at miR-497, na may mga pantulong na pagkakasunud-sunod para sa ilang partikular na mRNA.Bilang karagdagan, ang mahahabang non-coding RNAs (lncRNAs) at circular RNAs (cirRNAs) ay mahalaga din para sa maagang screening ng HCC.Ang mga lncRNA ay kumakatawan sa pinakamalawak na klase ng mga ncRNA, kabilang ang mga tulad ng mRNA na ncRNA, at kasangkot sa pathogenesis ng maraming mga sakit ng tao.Ang mga LncRNA ay gumaganap ng isang regulatory role sa liver microenvironment at talamak na sakit sa atay.74 Ang mga CircRNA ay isa ring klase ng mga ncRNA na may maraming pag-andar sa regulasyon ng pagpapahayag ng gene.Kamakailan lamang, ang mga circRNA ay itinuturing na mga diagnostic tool para sa HCC.
Ang sirkulasyon ng libreng RNA ay may kapansin-pansing katatagan, kabilang ang paglaban sa temperatura, pH, at RNase, na ginagawang hindi nakakapagod ang paghihiwalay ng fnRNA mula sa peripheral na dugo gamit ang mga karaniwang pamamaraan ng paglilinis ng RNA.Ang pinakakaraniwang ginagamit na mga pamamaraan ay kinabibilangan ng NGS, microarray at RT-qPCR.Pinapayagan ng NGS ang mga microRNA na masukat sa buong genome.Gayunpaman, ang pamamaraang ito ay mahal at ang pagsusuri ay hindi pamantayan.Sa kabaligtaran, ang RT-qPCR ay mura, mabilis na nagpapalaki ng mga nucleic acid, at nag-aalok ng maraming mga pakinabang tulad ng mas mataas na sensitivity, mas mataas na katumpakan, mas malawak na hanay ng dinamika, at nangangailangan ng mas kaunting mga sample.Ang mga microarray ay isa pang paraan na ginagamit para sa pagtuklas ng miRNA batay sa sensitibo at tiyak na hybridization ng mga target na miRNA na may mga pantulong na DNA probes, 75 ngunit ang pagsusuri ng data ng microarray ay nakakaubos ng oras.
Ang sirkulasyon ng miR-122 at Let-7 ay naiulat na potensyal na kapaki-pakinabang sa pag-diagnose ng maagang yugto ng HCC sa mga high-risk na grupo, mga marker sa mga pasyenteng may HBV-associated premalignant nodules at early-stage HCC.76 Cai et al.natagpuan na ang mga miyembro ng pamilyang Let-7 (miR-92, miR-122, miR-125b, miR-143, miR-192, miR-16, miR-126, at miR-199a/b) ay nasa panganib ng talamak. HCC sa mga pasyente na may hepatitis.Ang pamilyang Let-7 ay maaaring magsilbi bilang isang epektibong surrogate biomarker para sa paghula ng pagbuo ng HCC sa mga grupong may mataas na panganib na nauugnay sa talamak na hepatitis C. Ang 77 miR-122 ay may mataas na katumpakan ng diagnostic sa pag-detect ng maagang HCC sa mga pasyenteng may liver cirrhosis.78 Ang serum na nagpapalipat-lipat ng MiR-107 ay nasuri din sa mga unang yugto ng HCC, 79 at nagpakita ng magandang potensyal sa mga populasyon na may mataas na peligro.Iniulat ni Zhou et al na ang isang panel ng mga miRNA (miR-122, miR-192, miR-21, miR-223, miR-26a, miR-27a at miR-801) ay maaaring mag-iba ng HCC mula sa talamak na hepatitis B (CHB) at cirrhosis sensitivity ay 79.1% at 75%, at pagtitiyak 76.4% at 91.1%, ayon sa pagkakabanggit.80 Sa HCC na nauugnay sa HBV, nalaman namin na ang mga antas ng miR150 ay makabuluhang nabawasan kumpara sa mga nasa talamak na pasyente ng HBV na walang HCC (sensitivity 79.1%, specificity 76.5%).-224 ay nakataas sa HCC kumpara sa mga malusog na kontrol, at ang mga pagsusuri sa subgroup ay nagpakita ng mas mataas na antas sa mga pasyenteng may HCC na nauugnay sa HBV.Ang hepatitis B-associated cirrhosis at mga pasyente ng HCC ay nakilala ang isang siRNA classifier na naglalaman ng pitong differentially expressed siRNAs na maaaring makakita ng HCC sa iba't ibang mga kontrol;Ang hanay ng AUC sa maagang pagsusuri ay mas mahusay kaysa sa mga boluntaryo ng AFP.Natagpuan nila na apat na miRNA (miR-1972, miR-193a-5p, miR-214-3p, at miR-365a-3p) ang maaaring makilala ang mga pasyenteng may HCC mula sa mga pasyenteng walang HCC.Limang overexpressing miRNAs (miR-122-5p, miR-125b-5p, miR-885-5p, miR-100-5p, at miR-148a-3p) ay itinuturing na potensyal na impeksyon sa HBV sa HCC, cirrhosis, at CHB biomarker, lalo na Ang miR-34a-5p ay maaaring mga biomarker para sa liver cirrhosis, 85 at maaaring mga potensyal na biomarker para sa maagang screening ng HCC sa mga populasyon na may mataas na peligro.Ang pinaka-pinag-aralan na lncRNA sa HCC ay lubos na isinaaktibo sa kanser sa atay (HULC).Ipinakita ng iba pang mga pag-aaral na ang HULC na nagpapalipat-lipat sa mga pasyente ng HCC ay maaaring gamitin bilang isang diagnostic marker dahil ang lncRNA na ito ay lubos na na-upregulated sa mga pasyente ng HCC kumpara sa mga malulusog na indibidwal.71,86 Sa iba pang mga lnRNA, ang LINC00152 ay itinuturing na pinakamahusay na diagnostic na lncRNA dahil sa mataas na AUC, sensitivity at pagtitiyak nito.86 Sa isang pag-aaral, ang peripheral blood expression ng LINC00152 ay unti-unting tumaas mula sa normal na malusog na kontrol sa mga pasyenteng may CHB at cirrhosis, at sa wakas ay pinakamataas sa HCC.Ang mga pag-aaral ng pagpapahayag ng circSMMARCA5 sa plasma ng mga pasyente na may HCC ay nagpakita ng isang progresibong pagbaba sa pagpapahayag sa HCC mula sa hepatitis hanggang cirrhosis at precancerous lesyon.87 Ang pagsusuri sa mga curve ng ROC ay nakumpirma ang potensyal ng mga circRNA na ito sa pagkilala sa mga pasyente na may hepatitis o liver cirrhosis mula sa mga may HCC, lalo na sa mga may antas ng AFP na mas mababa sa 200 ng/mL.Bilang karagdagan, sinuri ni Zhu ang 13,617 cyclic RNA sa mga sample ng plasma mula sa mga pasyente ng HCC na nauugnay sa HBV at nakumpirma na ang 6 na cyclic RNA ay ipinahayag nang iba sa HCC at HBV na nauugnay sa cirrhosis, na nagmumungkahi na ang mga cRNA ay maaaring maging kapaki-pakinabang.mga marker para sa maagang pagsusuri ng mga pangkat na may mataas na panganib tulad ng mga nauugnay sa sakit sa atay, mga pasyente ng sclerosis.88
Ang mga exosome ay mga vesicle ng lamad na 40–160 nm ang lapad;maraming intracellular vesicle ang nagsasama sa cell membrane at inilalabas sa extracellular matrix.Naglalaman ang mga ito ng maraming aktibong sangkap, kabilang ang mga lipid, protina, RNA at DNA, at gumaganap ng mahalagang papel sa komunikasyon sa pagitan ng mga cell, parehong HCC at non-HCC na mga cell.Kinokontrol ng 89,90 Exosome ang pag-unlad ng HCC sa pamamagitan ng pag-activate ng mga hepatocyte fibroblast at stellate cells, immune cells, normal na hepatocytes, at HCC cells.91 Sa tumor microenvironment, ang mga tumor cells ay gumagawa ng malaking bilang ng mga exosome na dinadala mula sa mga selula ng kanser hanggang sa mga immature na selula, na kasangkot naman sa oncogenesis, degradation, at cellular signaling.92 Ipinakita ng mga pag-aaral na ang mga exosome ay maaaring maglipat ng mga oncogene sa mga normal na selula sa panahon ng mga proseso ng pathological, na maaaring isa sa mga mekanismo ng pagsalakay ng tumor at metastasis.93 Ang papel ng mga exosome sa pag-unlad ng kanser ay maaaring pabago-bago at tiyak sa uri ng kanser, 89 Ang mga Exosome ay maaaring i-internalize ng mga katabing o malayong mga cell upang i-regulate ang maramihang mga target na gene sa mga cell ng tatanggap na maaaring kasangkot sa mga intercellular communication ions at cellular microenvironment interaction, maaari silang pumagitna sa cellular signaling at metabolism.94 Ang mga katangian at dinamikong pagbabago ng exosome cargo molecule ay direktang sumasalamin sa mga katangian at dinamikong pagbabago ng mga selula ng tumor ng magulang, 95 na siyang batayan din para sa paggamit ng mga exosome sa diagnosis at pagbabala ng kanser, pati na rin para sa paghula ng indibidwal na tugon sa anticancer therapy. ..96
Ang mga tradisyunal na pamamaraan ng laboratoryo para sa pag-isolate at pagsusuri ng mga exosome ay kumplikado, maraming hakbang, at matagal, kabilang ang ultracentrifugation, filtration, size exclusion chromatography, immunoaffinity purification, Western blotting, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), PCR, at flow analysis.Ang mga miniaturized system at lab-on-a-chip platform na gumagamit ng micro/nanotechnology ay malawakang binuo para sa mabilis, maginhawang in situ na paghihiwalay ng mga exosome.Ang nanoparticle tracking analysis (NTA) ay isang malawakang ginagamit na paraan para sa pagkilala sa laki at konsentrasyon ng mga exosome, kabilang ang mga pamamaraan tulad ng magnetic nanoparticle at polyhydroxyalkanoates.Ang mga microfluidic at electrochemical na pamamaraan ay maaari ding mabilis na makakita ng mga exosome sa mataas na ani.
Ang mga exosomal na protina ay mahalagang mga marker para sa pagsusuri ng HCC.Sa pag-aaral sa Arbelaiz, ang antas ng 98 RasGAP SH3 binding protein (G3BP) at polymeric immunoglobulin receptor (PIGR) ay makabuluhang nakataas sa HCC-derived exosome, at ang putative na pinagsamang efficacy ng dalawang protina ay higit na mataas kaysa sa AFP.Ang sobrang karga ng bakal ay isang mahalagang salik na nag-aambag sa pagbuo ng HCC.Iniulat ni Tseng na ang hepcidin ay maaaring gumanap ng isang mahalagang papel sa paglaban sa HCC.99 Ang mga Exosome na nagmula sa sera ng mga pasyente ng HCC ay may mas mataas na bilang ng kopya ng mga variant ng hepcidin mRNA kaysa sa kanilang malusog na mga katapat, na nagmumungkahi na ang hepcidin ay maaaring isang nobelang diagnostic biomarker para sa HCC.Ang 14-3-3ζ na protina sa mga exosome na ginawa ng 100 HCC ay maaaring mabawasan ang T cell activation, proliferation, at differentiation at maaaring mag-udyok ng T cell transformation sa mga regulatory T cells, na nagreresulta sa T cell depletion.101 Sinusuportahan ito ng ilang pag-aaral na nagsisiyasat sa pag-iwas sa tumor mula sa pagsubaybay sa immune, 102 na maaaring mag-ambag sa HCC tumorigenesis.
Bilang karagdagan sa pagkakaroon ng ecRNA sa plasma o serum, ang RNA-enriched exosome ay maaaring gamitin para sa non-invasive real-time na staging sa maagang screening ng tumor at upang matukoy ang ebolusyon ng tumor at tugon sa therapy.Ang antas ng exosomal miRNA-21 sa serum ng dugo sa pangkat ng HCC ay 2.21 beses na mas mataas kaysa sa pangkat ng CHB, at sa pangkat ng HCC ito ay 5.57 beses na mas mataas kaysa sa malusog na populasyon.Sa pag-aaral ng Wang, ang mga exosome ay makabuluhang nadagdagan ang HCC kumpara sa mga pasyenteng cirrhotic na may mga halaga ng AUC na 0.83 (95% CI 0.74–0.93) at 0.94 (95% CI 0.88–1.00).104 Ang data na nakuha ay nagpapaliwanag sa paglahok ng mga tiyak na exosomal cargo molecule sa regulasyon ng oncogenesis at pag-unlad ng HCC.105 Ang serum expression ng miR-221, miR-103, miR-181c, miR-181a, miR-93 at miR-26a ay pare-pareho.at metastasis, at mga antas ng miR21 ay mas mataas sa mga pasyente ng HCC kaysa sa mga malusog na kontrol at gayundin sa mga pasyente ng CHB.102 Ang LncRNA ay may potensyal na diagnostic na halaga sa HCC.Ipinakita ng mga pag-aaral na ang mga exosome na nagmula sa sera ng mga pasyente ng HCC ay may mas mataas na antas ng LINC00161, LINC000635, at lncRNA na na-activate sa pamamagitan ng pagbabago ng growth factor-β kaysa sa mga pasyenteng walang HCC, at ang mga lncRNA na ito ay malakas na nauugnay sa yugto ng TNM at dami ng tumor.110 Conigliaro et al.Ang mga CD90+ exosome ay natagpuan na nagpapahayag ng mataas na antas ng lncRNAH19, na makabuluhang nadagdagan ang paglabas ng vascular endothelial growth factor (VEGF) at produksyon ng VEGF-R1 receptor, at sa gayon ay pinasisigla ang angiogenesis.93 Ang mga CircRNA ay isa pang uri ng mga exosomal na ncRNA - ipinahayag sa mas mababa ngunit matatag na antas sa mga species, ang mga circRNA ay nagpapakita rin ng pagtitiyak para sa uri ng cell, uri ng tissue, yugto ng pag-unlad, at aktibidad ng regulasyon.Ang 111 circRNAs ay diagnostic biomarker para sa maaga at minimally invasive na cancer.112 Ang mga kamakailang klinikal na pagsubok ay nagpakita na ang pagtitiyak ng mga indibidwal na miRNA sa paghula ng HCC ay hindi perpekto.Samakatuwid, ang kumplikadong pagtuklas gamit ang maramihang mga assay (hal., miR-122 at miR-48a kasama ng AFP) ay maaaring mapabuti ang pagkakakilanlan ng maagang HCC at ang pagkakaiba ng HCC mula sa cirrhosis.100
Ang mga pasyenteng may CHB at liver cirrhosis ay ang pinakakaraniwang pangkat na may mataas na panganib para sa pagbuo ng HCC.Para sa mga grupong may mataas na peligro, sa sandaling nakamit ang isang matagal na pagtugon sa virological, isang diskarte sa pagsubaybay na matipid sa gastos batay sa panganib ng HCC ay dapat na bumuo, at ang maagang pagsusuri ay ang susi sa pagpapabuti ng diagnosis at paggamot ng HCC na may mataas na ratio ng pagiging epektibo sa gastos2 ..Ang mga paraan ng maagang pagsusuri para sa kanser ay maraming limitasyon: ang mga epektibong pamamaraan ng maagang pagsusuri ay hindi pa binuo para sa karamihan ng mga uri ng kanser, at kadalasang mababa ang pagsunod.Kung ikukumpara sa mga tradisyonal na pamamaraan ng maagang screening, ang liquid biopsy na teknolohiya ay may malinaw na mga pakinabang: kadalian ng sampling, panrac detection, magandang sample reproducibility, at epektibong pagtugon sa tumor heterogeneity.Dahil sa pagiging epektibo sa gastos ng mga pamamaraan na nauugnay sa likidong biopsy, ang kanilang paggamit sa HCC screening ay hindi regular na nasubok.Sa kabila ng mga pagsulong sa tumpak na pagtuklas sa antas ng molekular, ang fluid biopsy ay magastos upang makita ang HCC sa mga target na pasyente, na nililimitahan ang malawakang paggamit nito kumpara sa mga partikular na pamamaraan ng imaging gaya ng ultrasound at magnetic resonance imaging.113,114 Gayunpaman, ang isang nakaraang pag-aaral ay nagpakita na ang likidong biopsy ay nagpakita ng isang makabuluhang benepisyo sa mga tuntunin ng mga taon ng buhay na nababagay sa kalidad (QALYs).115 Ang mga benepisyo ng liquid biopsy sa maagang carcinoma ng tiyan at nasopharynx ay ipinakita rin.116,117 Ang kasalukuyang pananaw ay ang likidong biopsy ay maaaring makadagdag sa mga serum biomarker at radiological screening sa pagtuklas at pagsusuri ng mga tumor.117 118
Ayon sa kasalukuyang literatura, ang fluid biopsy na teknolohiya ay nagpakita ng mas mataas na sensitivity at specificity sa maagang screening ng mga high-risk group para sa liver cancer.Anuman ang uri ng fluid biopsy, maaari nitong makilala ang HCC mula sa mga indibidwal na may mataas na panganib na walang HCC, na nagmumungkahi ng kahalagahan ng maagang screening dahil ang mga pagkakaiba sa pagitan ng mga high-risk at malusog na indibidwal ay maliwanag.Ang ctDNA ay may maikling kalahating buhay at maaaring magamit upang makita ang HCC, kaya ang anumang mga pagbabago sa tumor-derived cDNA ay maaaring magbigay ng real-time na kongkretong ebidensya ng pag-unlad ng tumor, lalo na para sa maliliit na tumor.Ang mataas na antas ng ctDNA ay nagpapahiwatig ng pag-unlad at pagkalat ng kanser at isang maagang tagapagpahiwatig ng pag-unlad at pag-ulit.Bilang karagdagan, batay sa mga resulta ng ctDNA, ang mga pasyente ay maaaring makatanggap ng indibidwal na paggamot at follow-up.119 Ang mga partikular na site ng methylation ay maaaring isang mas mahusay na marker kaysa sa AFP para sa maagang pagkilala sa HCC at cirrhotic nodules.Sa mga resectable na kaso ng HCC, ang mataas na antas ng cDNA ay nagpapahiwatig ng microvascular invasion at postoperative recurrence at metastasis.Ang mga pagbabago sa numero ng kopya ay nauugnay sa kaligtasan ng mga pasyente na may HCC.Maaaring ipagpalagay na ang pagsusuri ng cDNA ay maaaring kasangkot sa pangkalahatang paggamot ng HCC, at ang cDNA ay maaaring magsilbi bilang isang epektibong tagapagpahiwatig ng therapeutic modulation.Ang mga marker batay sa mga tiyak na genetic mutations sa ctDNA ay pinagtibay ng mga klinikal na alituntunin upang mahulaan ang pagiging epektibo at subaybayan ang paglaban sa droga.Ang ctDNA testing ay maaaring ang pinakakapaki-pakinabang na liquid biopsy tool para sa maagang pagsusuri.Ang mga CTC ay gumaganap din ng mahalagang papel sa maagang pag-screen ng mga high-risk na HCC group.Ang iba't ibang mga marker ng HCC-associated CTCs ay partikular na kahalagahan sa pagsisimula, pag-unlad, at pag-ulit ng HCC.Bilang mga vesicle ng lamad, ang mga exosome ay kasangkot sa mga intercellular na komunikasyon, lalo na sa mga selula ng HCC.Ang mga umiikot na microRNA ay matatag sa dugo at sa gayon ay maaaring maging mas kapaki-pakinabang para sa maagang pagsusuri ng HCC.Unti-unti, natuklasan ang mga exosomal protein at RNA-rich exosome, at nakumpirma ang kanilang predictive efficacy para sa HCC.Kapansin-pansin, ang iba't ibang mga etiologies ng HCC ay maaari ding maiugnay sa iba't ibang mga mutasyon, kaya maaari tayong pumili ng iba't ibang mga biomarker para sa maagang screening batay sa iba't ibang mga etiologies ng HCC.120
Gayunpaman, ang mga kasalukuyang fluid biopsy technique ay kaduda-dudang sa mga tuntunin ng katatagan at hindi maaaring independiyenteng magsagawa ng maagang screening o pagsubaybay sa HCC, ngunit maaari pa ring makadagdag sa indibidwal na screening at diagnosis.121 Bilang isang anyo ng liquid biopsy, ang pagtuklas at pag-imaging ng ctDNA, CTC, cfRNA at exosome-associated AFP o PIVKA-II ay may mga promising application sa maagang diagnosis at prognosis ng HCC.Gayunpaman, ang eksaktong mekanismo ng paglabas ng ctDNA sa dugo ay nananatiling ipaliwanag.Ang pagbubunyag ng mga pangunahing biological na katangian ng ctDNA ay maaaring mapadali ang paggamit nito bilang isang marker.Ang maliit na halaga ng ctDNA sa sirkulasyon at mahigpit na mga kinakailangan sa paghawak ng sample ay mga hamon para sa klinikal na pagpapatupad ng pagtuklas ng cDNA sa HCC.Bilang karagdagan, ang genetic mutations ay walang mga partikular na tampok na nagbibigay-daan sa tumpak na pagkakakilanlan ng mga carcinogens.Dahil ang maramihang mga genetic at somatic na variant ay naroroon din sa mga normal na tisyu, ang mga genetic mutations na natukoy ng fluid biopsy ay maaaring limitado ang utility sa maagang screening para sa HCC.122 Ang mga limitasyon ng mahusay na tinukoy na kapaki-pakinabang na mga target ng gene at mga biomarker na tumutulong sa pagkakaiba ng cDNA mula sa non-tumor na DNA ay ang pinakamahalagang isyu sa paggamit ng cDNA.kakulangan ng pagiging kapaki-pakinabang ng sensitibo at tiyak na mga marker para sa pagtuklas ng mga CTC.Ang mga mabubuhay na cell lamang na may potensyal na metastatic ang natagpuan, at ang pinakamainam na kumbinasyon ng mga marker na pinayaman ng CSC ay hindi malinaw.Ang paghihiwalay ng mga CTC para sa kultura at pagsusuri ng kanilang mga mutational profile ay isa ring mapaghamong gawain.Dahil sa mga problema sa pagkakakilanlan, paghihiwalay at paglilinis ng mga exosom, ang partikular na mekanismo ng molekular ay hindi pa rin malinaw, at ang mga nakaraang pag-aaral sa mekanismo ng mga exosome at HCC ay hindi pa malalim, at ang paraan ng mga miRNA, lncRNA, at mga protina ay pinagsunod-sunod sa mga exosom , at hindi malinaw kung ang exosome uptake ay isang partikular na uri ng proseso.Ang paggamit ng mga exosome para sa diagnosis at paggamot ng HCC ay nasa preclinical stage pa rin.Ang kakulangan ng standardisasyon ng mga pamamaraan ng liquid biopsy, tulad ng uri ng mga tubo na ginagamit upang mangolekta ng dugo, dami ng dugo, pag-imbak at pagtuklas ng sample, paghihiwalay at pagpapayaman, ay maaaring makahadlang sa paggamit ng mga ito sa nakagawiang klinikal na kasanayan dahil sa mga pagkakaiba sa mga kasanayan sa mga medikal na sentro.Ang bisa ng likidong biopsy sa maagang screening, diagnosis, pagsusuri ng efficacy, at hula ng HCC ay nananatiling ginalugad, lalo na para sa mga pangkat na may mataas na panganib.Ang teknolohiyang biopsy ng likido ay may malaking potensyal at inaasahang malawakang magamit sa klinikal na kasanayan ng kanser sa atay sa malapit na hinaharap.
1. Sung H., Furley J., Siegel RL et al.Global Cancer Statistics 2020: Tinatantya ng GLOBOCAN ang insidente at namamatay mula sa 36 na uri ng cancer sa 185 na bansa.CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.doi: 10.3322/caac.21660
2. Punong-tanggapan ng National Health Commission.Pamantayan para sa pagsusuri at paggamot ng pangunahing kanser sa atay (2022 na edisyon) [J].Journal of Clinical Liver Diseases, 2022, 38(2): 288-303.doi: 10.3969/j.issn.1001-5256.2022.02.009
3. Zhou J, Sun H, Wang Z, et al.Mga alituntunin para sa diagnosis at paggamot ng hepatocellular carcinoma (2019 edition).Kanser sa atay.2020;9(6):682-720.doi: 10.1159/000509424
4. Kokudo N, Takemura N, Hasegawa K, et al.Mga alituntunin sa klinikal na kasanayan para sa hepatocellular carcinoma: Japanese Society for Liver Diseases, 2017 (JSH-HCC 4th guidelines), 2019 update.Reservoir ng Sakit sa Atay.2019;49(10):1109–1113.doi:10.1111/hepr.13411
5. Barrera-Saldana HA, Fernandez-Garza LE, Barrera-Barrera SA Liquid biopsy sa malalang sakit sa atay.Ann Hepato.2021;20:100197.doi:10.1016/j.aohep.2020.03.008
6. Tai TKYu., Tan P.Kh.Liquid breast cancer biopsy: isang nakatutok na pagsusuri.Arch Pathol Lab Med.2021;145(6):678–686.doi: 10.5858/arpa.2019-0559-RA
7. Kanval F., Singal AG Surveillance para sa hepatocellular carcinoma: kasalukuyang pinakamahuhusay na kagawian at mga direksyon sa hinaharap.Gastroenterology.2019;157(1):54-64.doi:10.1053/j.gastro.2019.02.049
8. European Research Association L, European Organization R, C Therapeutics.Mga alituntunin sa klinika EASL-EORTC: paggamot ng hepatocellular carcinoma.J Heparin.2012;56(4):908–943.doi:10.1016/j.jhep.2011.12.001
9. Zhang G., Ha SA, Kim HK et al.Pinagsamang pagsusuri ng AFP at HCCR-1 bilang mga kapaki-pakinabang na serological marker sa maliit na hepatocellular carcinoma: isang prospective na pag-aaral ng cohort.Si Mark.2012;32(4):265–271.doi: 10.3233/DMA-2011-0878
10. Chen S, Chen H, Gao S, et al.Differential expression ng plasma microRNA-125b sa hepatitis B virus-associated liver disease at diagnostic potential ng hepatitis B virus-induced hepatocellular carcinoma.Reservoir ng sakit sa atay.2017;47(4):312-320.doi:10.1111/hepr.12739
11. Halle PR, Foster F., Kudo M. et al.Biology at kahalagahan ng alpha-fetoprotein sa hepatocellular carcinoma.Atay int.2019;39(12):2214–2229.doi: 10.1111/liv.14223
12. Omata M, Cheng AL, Kokudo N, et al.Mga klinikal na alituntunin para sa paggamot ng hepatocellular carcinoma sa rehiyon ng Asia-Pacific: 2017 update.International Organization for Liver Diseases.2017;11(4):317–370.doi: 10.1007/s12072-017-9799-9
13. Xu Fei, Zhang Li, He Wei et al.Diagnostic na halaga ng serum PIVKA-II nag-iisa o kasama ng AFP sa mga pasyenteng Tsino na may hepatocellular carcinoma.Si Mark.2021;2021:8868370.doi: 10.1155/2021/8868370
14. Durin L., Praradines A., Basset S. et al.Non-small cell lung cancer non-plasma humoral fluid biopsy: mas malapit sa tumor!cell.2020;9(11).doi: 10.3390/cells9112486
15. Mader S, Pantel K. Liquid biopsy: kasalukuyang katayuan at mga prospect sa hinaharap.Paggamot Oncol Res.2017;40(7-8):404-408.doi: 10.1159/000478018
16. Palmirotta R, Lovero D, Cafforio P, et al.Liquid-based cancer biopsy: isang multimodal diagnostic tool sa clinical oncology.Ang Adv Med Oncol.2018;10:1758835918794630.doi: 10.1177/1758835918794630
17. Mandel P., Metais P. Mga nucleic acid sa plasma ng tao.CR Seances Soc Biol Fil.1948;142(3-4):241-243.
18. Mouliere F, Chandrananda D, Piskorz AM, et al.Advanced na pagtuklas ng nagpapalipat-lipat na DNA ng tumor sa pamamagitan ng pagsusuri sa laki ng fragment.Ang agham ay nagsasalin ng gamot.2018;10:466.doi:10.1126/scitranslmed.aat4921
19. Underhill HR, Kitzman JO, Hellwig C. et al.Umiikot na haba ng fragment ng DNA ng tumor.Mga gene ng PLOS.2016;12(7):e1006162.doi:10.1371/journal.pgen.1006162
20. Cheng F, Su L, Qian C. Umiikot na tumor DNA: isang promising biomarker sa liquid-based na biopsy ng kanser.target na tumor.2016;7(30):48832–48841.doi:10.18632/oncotarget.9453
21. Bettegovda S., Sauzen M., Leary RJ et al.Ang pagtuklas ng nagpapalipat-lipat na DNA ng tumor sa maaga at huling mga yugto ng mga malignancies ng tao.Ang agham ay nagsasalin ng gamot.2014;6(224):224ra24.doi:10.1126/scitranslmed.3007094
22. Mehes G. Liquid biopsy para sa mutational predictive analysis ng solid cancer: pananaw ng isang pathologist.J Bioteknolohiya.2019;297:66-70.doi: 10.1016/j.jbiotec.2019.04.002
[PubMed] 23. Lenarts L, Tuveri S, Yatsenko T, et al.Maagang pagtuklas ng tumor sa pamamagitan ng circulating plasma DNA screening: hype o pag-asa?Batas sa klinika ng Belgian.2020;75(1):9-1 doi:10.1080/17843286.2019.1671653
24. Nishida N. Epekto ng hepatitis virus at pagtanda sa DNA methylation sa hepatocarcinogenesis ng tao.Histopathology.2010;25(5):647–654.doi: 10.14670/HH-25.647